操作方式：通過(guò)物理手段，如使用剪刀、鑷子等器械將腫瘤組織剪碎，再利用研磨、勻漿等方式進(jìn)一步破碎組織，使細(xì)胞分散?；蛘呤褂媒M織研磨器、勻漿器等儀器，對(duì)腫瘤組織進(jìn)行機(jī)械研磨和勻漿處理，從而獲得單細(xì)胞懸液。

優(yōu)缺點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單、成本低，不需要特殊的試劑。缺點(diǎn)是容易造成細(xì)胞損傷，細(xì)胞活性和得率較低，而且對(duì)于質(zhì)地較硬的腫瘤組織，解離效果可能不佳。

操作方式：利用化學(xué)試劑破壞細(xì)胞間的連接，使腫瘤組織分散成單細(xì)胞。常用的試劑如胰蛋白酶、乙二胺四乙酸（EDTA）等。胰蛋白酶能夠水解細(xì)胞間的蛋白質(zhì)連接，EDTA 則可以螯合細(xì)胞外的鈣離子，破壞細(xì)胞間的鈣依賴連接。通常是將腫瘤組織切成小塊，放入含有胰蛋白酶或 EDTA 的消化液中，在適宜的溫度和時(shí)間條件下進(jìn)行消化，使細(xì)胞解離。

優(yōu)缺點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)是解離效率較高，能夠快速獲得大量單細(xì)胞。缺點(diǎn)是化學(xué)試劑可能對(duì)細(xì)胞表面抗原和細(xì)胞功能產(chǎn)生影響，而且消化時(shí)間和試劑濃度需要嚴(yán)格控制，否則容易導(dǎo)致細(xì)胞過(guò)度消化而死亡。

操作方式：先將腫瘤組織制備成單細(xì)胞懸液，然后標(biāo)記細(xì)胞表面的特異性抗原，使用流式細(xì)胞儀根據(jù)細(xì)胞的大小、粒度以及表面抗原的表達(dá)情況，對(duì)單細(xì)胞進(jìn)行分選。通過(guò)流式細(xì)胞儀的激光檢測(cè)和細(xì)胞分類裝置，將不同特征的細(xì)胞分離開來(lái)，收集到特定的細(xì)胞群體，從而獲得純凈的單細(xì)胞懸液。

優(yōu)缺點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)是能夠精確地分離出特定類型的腫瘤細(xì)胞，純度高，可同時(shí)對(duì)多個(gè)參數(shù)進(jìn)行分析和分選。缺點(diǎn)是儀器設(shè)備昂貴，操作復(fù)雜，需要專業(yè)人員進(jìn)行操作，而且對(duì)于細(xì)胞懸液的質(zhì)量要求較高，細(xì)胞濃度和活性會(huì)影響分選效果。

操作方式：利用微流控芯片，將腫瘤組織單細(xì)胞懸液引入芯片的微通道中。通過(guò)微通道內(nèi)的物理結(jié)構(gòu)和流體力學(xué)原理，實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞的捕獲、分離和培養(yǎng)。例如，利用微柱陣列、液滴微流控等技術(shù)，將單個(gè)細(xì)胞包裹在微小的液滴或微腔室中，實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞的分離和培養(yǎng)。

優(yōu)缺點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)是能夠在微觀尺度上精確操控細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)高通量的單細(xì)胞分析，所需樣本量少，對(duì)細(xì)胞的損傷小。缺點(diǎn)是芯片的制備和操作較為復(fù)雜，技術(shù)難度高，成本也相對(duì)較高，而且通量有限，難以處理大量的腫瘤組織樣本。