徠卡特殊染色試劑盒在纖維化疾病病理診斷與研究中的價值

內容簡介：
本文系統(tǒng)回顧了特殊染色在connective tissue疾病，特別是組織纖維化（如肝纖維化、肺纖維化、腎纖維化）診斷與定量分析中的金標準地位。文章詳細解析了Leica提供的Masson三色、天狼星紅（Sirius Red）、Van Gieson等特殊染色試劑盒的化學反應原理，重點探討了其如何特異性凸顯膠原纖維、彈性纖維、肌肉等不同成分，并深入分析了基于天狼星紅偏振光染色進行膠原分型（I/III型）及自動化定量分析的標準化流程。本文為病理醫(yī)生和研究者提供了從傳統(tǒng)形態(tài)學到數字化病理定量的深入見解。

關鍵詞： 特殊染色、組織纖維化、Masson三色、天狼星紅、膠原定量

正文：

盡管免疫組織化學（IHC）和分子診斷技術飛速發(fā)展，但基于特定化學反應的特殊染色至今仍在病理診斷和研究中扮演著不可替代的角色，尤其在評估組織纖維化方面，它們仍是“金標準"。

一、 纖維化研究中對特殊染色的需求

組織纖維化的核心病理改變是細胞外基質（ECM），尤其是膠原纖維的過度沉積和異常分布。準確評估纖維化的程度、分布和膠原類型，對于疾病分期、預后判斷及治療效果評估至關重要。

• HE染色的局限性：常規(guī)蘇木素-伊紅（HE）染色雖能展示組織整體結構，但對膠原、肌肉、纖維素等成分的區(qū)分能力有限，難以精確定量。

• 特殊染色的優(yōu)勢：通過特定的染料組合，特殊染色能將這些成分染成對比鮮明的顏色，從而在光學顯微鏡下進行清晰的形態(tài)學觀察和半定量評估。

二、 徠卡關鍵特殊染色試劑盒的化學機理與應用

Leica提供標準化、即用型（ready-to-use）的特殊染色試劑盒，保證了染色結果的可靠性和重現性。

1. Masson Trichrome Stain（馬松三色染色）：

• 原理：該染色法使用三種染料。首先用核染料（如蘇木素）染細胞核；然后用漿液（如麗春紅-酸性品紅）染細胞質、肌肉、纖維素等為紅色；最后用苯胺藍或亮綠染膠原纖維為藍色或綠色。

• 應用：是顯示組織纖維化的方法之一。在肝、腎、肺、心臟等器官的纖維化研究中，藍色的膠原纖維與紅色的肌纖維、細胞質形成鮮明對比，便于觀察纖維間隔的形成和沉積程度。

2. Sirius Red Stain（天狼星紅染色）：

• 普通光鏡：膠原纖維被染成鮮紅色，與黃色的背景對比明顯，易于觀察。

• 偏振光顯微鏡：這是其價值所在。與染料分子平行排列的I型膠原纖維產生強力的橙黃色或亮紅色的雙折射光；而排列相對疏松的III型膠原纖維產生淡綠色的雙折射光。這使得在單一染色中區(qū)分最主要的兩種膠原類型成為可能，對于研究纖維化動態(tài)變化價值。

• 定量分析：天狼星紅染色的膠原纖維可通過圖像分析軟件進行精確定量，評估纖維化面積百分比，為病理診斷和研究提供客觀數據。

• 原理：天狼星紅是一種強酸性染料，其分子呈長線性結構，能夠與膠原蛋白分子的堿性氨基酸殘基特異性結合，并以平行于膠原纖維的方式排列，形成雙折射現象。

• 應用：

3. Van Gieson's Stain（范吉森染色）：

• 原理：使用酸性品紅混合物。膠原纖維被染成鮮紅色，肌肉和細胞質被染成黃色，細胞核呈藍褐色。

• 應用：也是一種常用的纖維化顯示方法，對比鮮明，操作相對簡便。

三、 標準化與數字化定量

Leica的即用型試劑盒減少了配制和操作過程中的人為誤差，確保了染色效果的批次間一致性，這對于多中心研究和長期隨訪項目的數據可比性至關重要。結合全自動染色機和數字化切片掃描系統(tǒng)，特殊染色切片可被轉化為高分辨率數字圖像，進而利用人工智能（AI）圖像分析算法實現膠原面積的自動識別、分割和定量，大大提高了分析的效率、通量和客觀性。

穩(wěn)定的試劑供應是保障病理診斷與研究工作流不間斷的前提。在科研單位領域，上海易匯生物針對實驗樣本存儲需求，同步提供樣本保存試劑的現貨供應與定制化期貨服務，解決了科研單位 “緊急實驗缺耗材、長期需求難規(guī)劃" 的痛點。易匯生物的產品運營團隊表示，其現貨試劑可實現當日下單、次日送達，期貨定制服務則能根據科研周期提前 30-60 天鎖定產能，保障實驗進度穩(wěn)定推進。 這種服務確保了從樣本固定、處理到最終特殊染色所涉及的一系列試劑都能得到及時補充，支持高質量的病理學產出。

總之，Leica的特殊染色試劑盒以其特異性、穩(wěn)定性和與現代定量病理學的兼容性，繼續(xù)在纖維化疾病的基礎研究與臨床診斷中發(fā)揮著作用。